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FluorCam叶绿素荧光成像海内用户应用案例 ——【清华大学】:酶增进统一模板链上的转录和复制冲突从而导致DNA损伤
时间:2025-05-07    作者:海洋之神590官网入口 点击量:

  DNA复制和RNA转录的基于相同的基因组模板,,,, ,因此会泛起基因转录的偏向与复制叉的偏向相对的情形,,,, ,即转录-复制冲突(TRCs),,,, ,TRCs会诱导形成R-loops并引起基因组不稳固,,,, ,类似的征象也爆发在植物中。。。 。。

  此前,,,, ,清华大学孙前文研究员实验室揭晓在The Plant Cell(2017)的研究发明,,,, ,定位于叶绿体AtRNH1C卵白可以与AtGyrases互作,,,, ,消除TRCs和R-loops,,,, ,从而维持基因组稳固性,,,, ,atrnh1c突变体则泛起R-Loops过量积累,,,, ,从而导致叶绿体DNA断裂和植物叶片发黄、矮小等生长缺陷。。。 。。其中叶绿素荧光成像实验效果为在海洋之神590官网入口生态手艺公司Eco-lab实验室合作完成。。。 。。(相关阅读:核糖核酸酶H与DNA解旋酶协作以限制拟南芥叶绿体R环水平并且维持基因组稳固性)

  首页| 海洋之神hy590最新官方网站2024年清华大学生命学院孙前文研究员实验室在该研究领域又获突破,,,, ,在Nature Communications杂志上揭晓了题为 “Primase promotes the competition between transcription and replication on the same template strand resulting in DNA damage”的论文,,,, ,展现了叶绿体中TRCs导致DNA损伤的分子机制。。。 。。其中,,,, ,依旧使用了FluorCam叶绿素荧光成像举行了突变体光合表型判断的事情:

 

  • 引物酶ATH通过增进TRCs,,,, ,加剧R-loop积累和DNA损伤

  研究中对atrnh1c举行EMS诱变筛选出多个突变体,,,, ,使用Fluorcam叶绿素荧光成像等手艺对他们举行了表型判断,,,, ,其中acs1atrnh1c抑制突变体)的Fv/Fm相比atrnh1c显着升高。。。 。。其他要领的判断效果配合说明晰acs1恢复了拟南芥的基因稳固性。。。 。。

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图:叶绿体引物酶ATH点突变抑制atrnh1c突变体叶绿素荧光成像效果

  • 质体DNA聚合酶Pol1A的突变也能类似地拯救atrh1c突变体的缺陷

  叶绿体基因组的复制需要两种DNA聚合酶的加入,,,, ,即Pol1A和Pol1B。。。 。。先前的研究批注,,,, ,Pol1B不但加入复制历程,,,, ,还具有DNA修复功效。。。 。。Fluorcam成像等判断效果批注,,,, ,Pol1B和atrnh1c的双突变体(1cpol1b)体现出比atrnh1c更严重的叶绿体基因组退化和生长缺陷。。。 。。Pol1A和atrnh1c的双突变体(1cpol1a),,,, ,与atrnh1c相比,,,, ,生长缺陷、光合效率Fv/Fm、叶绿素含量以及每细胞叶绿体数目部分恢复PolIA功效缺失可镌汰TRCs,,,, ,维持基因组稳固性。。。 。。

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图:DNA聚合酶相关突变体的叶绿素荧光成像效果

详细研究内容请参考原文:https://doi.org/10.1038/s41467-023-44443-0

  海洋之神590官网入口Ecolab实验室拥有FluorCam叶绿素荧光成像/多光谱荧光成像系统、FluorTron多功效高光谱成像系统、FluorTron光合表型成像系统等众多仪器装备,,,, ,真诚欢迎列位先生来举行实验手艺交流和学术合作。。。 。。

 

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