DNA复制和RNA转录的基于相同的基因组模板,,,,,因此会泛起基因转录的偏向与复制叉的偏向相对的情形,,,,,即转录-复制冲突(TRCs),,,,,TRCs会诱导形成R-loops并引起基因组不稳固,,,,,类似的征象也爆发在植物中。。。。。
此前,,,,,清华大学孙前文研究员实验室揭晓在The Plant Cell(2017)的研究发明,,,,,定位于叶绿体AtRNH1C卵白可以与AtGyrases互作,,,,,消除TRCs和R-loops,,,,,从而维持基因组稳固性,,,,,atrnh1c突变体则泛起R-Loops过量积累,,,,,从而导致叶绿体DNA断裂和植物叶片发黄、矮小等生长缺陷。。。。。其中叶绿素荧光成像实验效果为在海洋之神590官网入口生态手艺公司Eco-lab实验室合作完成。。。。。(相关阅读:核糖核酸酶H与DNA解旋酶协作以限制拟南芥叶绿体R环水平并且维持基因组稳固性)
2024年清华大学生命学院孙前文研究员实验室在该研究领域又获突破,,,,,在Nature Communications杂志上揭晓了题为 “Primase promotes the competition between transcription and replication on the same template strand resulting in DNA damage”的论文,,,,,展现了叶绿体中TRCs导致DNA损伤的分子机制。。。。。其中,,,,,依旧使用了FluorCam叶绿素荧光成像举行了突变体光合表型判断的事情:
研究中对atrnh1c举行EMS诱变筛选出多个突变体,,,,,使用Fluorcam叶绿素荧光成像等手艺对他们举行了表型判断,,,,,其中acs1(atrnh1c抑制突变体)的Fv/Fm相比atrnh1c显着升高。。。。。其他要领的判断效果配合说明晰acs1恢复了拟南芥的基因稳固性。。。。。

图:叶绿体引物酶ATH点突变抑制atrnh1c突变体叶绿素荧光成像效果
叶绿体基因组的复制需要两种DNA聚合酶的加入,,,,,即Pol1A和Pol1B。。。。。先前的研究批注,,,,,Pol1B不但加入复制历程,,,,,还具有DNA修复功效。。。。。Fluorcam成像等判断效果批注,,,,,Pol1B和atrnh1c的双突变体(1cpol1b)体现出比atrnh1c更严重的叶绿体基因组退化和生长缺陷。。。。。Pol1A和atrnh1c的双突变体(1cpol1a),,,,,与atrnh1c相比,,,,,生长缺陷、光合效率Fv/Fm、叶绿素含量以及每细胞叶绿体数目部分恢复PolIA功效缺失可镌汰TRCs,,,,,维持基因组稳固性。。。。。

图:DNA聚合酶相关突变体的叶绿素荧光成像效果
详细研究内容请参考原文:https://doi.org/10.1038/s41467-023-44443-0
海洋之神590官网入口Ecolab实验室拥有FluorCam叶绿素荧光成像/多光谱荧光成像系统、FluorTron多功效高光谱成像系统、FluorTron光合表型成像系统等众多仪器装备,,,,,真诚欢迎列位先生来举行实验手艺交流和学术合作。。。。。
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